分光光度計(jì)測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。根據(jù)可測量波長范圍的不同，分光光度計(jì)常分為：紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。今天搜科采購管家重點(diǎn)為您介紹的是可見分光光度計(jì)的選購注意事項(xiàng)。

　　按照慣例，在選購儀器之前我們先要摸清自己的需求：

　　你們實(shí)驗(yàn)室使用分光光度計(jì)的常規(guī)應(yīng)用有哪些？

　　你們對分光光度計(jì)的靈敏度有何要求？

　　是否多人共用一臺分光光度計(jì)？

　　是否需要同時(shí)測量多個(gè)樣品？

　　要測量樣品的體積范圍是怎樣的？

　　對分光光度計(jì)的使用頻率和使用時(shí)長是怎樣的？

　　以上問題的答案，可能會影響您對可見分光光度計(jì)的功能要求、靈活性要求、帶寬要求，是否需要預(yù)設(shè)程序等智能功能等等。如果使用頻率高、時(shí)間長，對產(chǎn)品的質(zhì)量和耐久性就有比較高的要求。

　　帶著這些問題，我們來看看可見分光光度計(jì)產(chǎn)品都有哪些功能和特點(diǎn)，其中又有哪些是選購時(shí)必須考慮的硬性指標(biāo)。

　　1、儀器的原理和主要部件

　　分光光度計(jì)主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。

　　其工作原理是：

　　分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收。樣品對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該樣品的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定，故又稱比色分析。

　　從以上原理，可以引出分光光度計(jì)最重要的配件——比色杯。

　　比色杯按照材質(zhì)大致分為石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根據(jù)不同的測量體積，有比色杯和毛細(xì)比色杯等。

　　2、分光光度計(jì)的常見用途

　　可見分光光度計(jì)是在可見光區(qū)域內(nèi)對物質(zhì)做定性、定量分析。常見的用途有以下幾種：

　　（1）比色法蛋白質(zhì)定量

　　比色法的測定原理是組成蛋白質(zhì)的氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。

　?。?）核酸的定量

　　核酸的定量是分光光度計(jì)使用頻率最高的功能?？梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。

　　（3）OD600細(xì)菌細(xì)胞密度

　　實(shí)驗(yàn)室確定細(xì)菌生長密度和生長期，多根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和目測推斷細(xì)菌的生長密度。在遇到要求較高的實(shí)驗(yàn)，需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測定細(xì)菌細(xì)胞密度。OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長的標(biāo)準(zhǔn)方法。

　　3.性能參數(shù)指標(biāo)

　?。?）波長

　　波長范圍、波長查找方式、波長的準(zhǔn)確度和重復(fù)性都是需要考慮的重要指標(biāo)。

　　波長涵蓋范圍越大越好，自動查找比手動查找好，所示波長和實(shí)際波長越符合越好。

　　（2）帶寬

　　分光光度計(jì)的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。狹縫寬度參數(shù)，以及狹縫寬度是固定的還是連續(xù)可選的，都代表著該儀器的性能。

　?。?）能測量的樣品量

　　樣品量也是重要的考量因素。如果比色杯容量太大，那測量珍貴樣品時(shí)是非常浪費(fèi)的。現(xiàn)在很多光度計(jì)的樣品量都趨于微量化了。

　　（4）光度準(zhǔn)確度

　　光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。肯定是準(zhǔn)確度越高越好。

　?。?）雜散光

　　雜散光是光譜測量中誤差的主要來源。雜散光越小越好。

　?。?）穩(wěn)定性

　　穩(wěn)定性是精密測量儀器的硬性指標(biāo)，測量結(jié)果肯定是越準(zhǔn)確、越穩(wěn)定越好。

　?。?）噪聲

　　噪聲肯定是越小越好，這個(gè)不用解釋。

　?。?）儀器的大小

　　很多實(shí)驗(yàn)室空間有限，滿足使用要求的基礎(chǔ)上，儀器肯定是占地面積越小、重量越輕越好。